Эпителиальный измеритель вольт/Ом (TEER) EVOM™ Manual 

Эпителиальный вольтметр нового поколения — измерение TEER (транс-эпителиального электрического сопротивления) с автоматической регистрацией данных.

EVOM™ Manual — это устройство нового поколения для измерения трансэпителиального/эндотелиального электрического сопротивления (TEER), предназначенное для оценки целостности клеточного барьера, плотности и проницаемости в моделях in vitro. Оно обеспечивает измерения с высоким разрешением и низким уровнем шума, а также автоматическую регистрацию данных, что делает его идеальным для исследований в культурах эпителиальных и эндотелиальных клеток.

Основные особенности EVOM™ Manual

• Малошумная конструкция для высокоточных измерений TEER с высоким разрешением
• Автоматическое усреднение 20 образцов для повышения стабильности и воспроизводимости
• Автоматический выбор диапазона сопротивления (от 1 Ом до 100 000 Ом) с регулируемыми настройками тока (2, 4 или 10 мкА)
• Быстрая стабилизация для измерений с низким сопротивлением (<200 Ом) с разрешением до 0,1 Ом
• Автоматическая запись данных на USB-накопитель (формат CSV), совместимый с ПК, Mac и Linux
• Графическое отображение для 6, 12, 24 и 96-луночных планшетов для анализа тенденций
• Автоматическая индексация планшетов с возможностью вычитания контрольных лунок
• Работа при низком токе и низком напряжении для предотвращения переноса ионов металлов и сохранения целостности клеток
• Обновляемая прошивка для долгосрочной гибкости
• НОВИНКА: В дополнение к существующей возможности хранения данных на USB-накопителе, новая версия EVOM™ Manual теперь предоставляет возможность более безопасного режима передачи данных с использованием сопутствующего приложения для Windows®.

Преимущества EVOM™ Manual

• Сокращает объем ручной обработки данных и экспериментальные ошибки
• Улучшает воспроизводимость благодаря стабильным усредненным измерениям
• Экономит время благодаря автоматизированному сбору данных и индексации планшетов
• Поддерживает работу без помощи рук с помощью дополнительного ножного переключателя
• Компактные размеры для эффективного использования рабочего пространства
• Позволяет легко рассчитать TEER из значений сопротивления с использованием нормализации площади поверхности
• Доступна расширенная гарантия

Как это работает

EVOM™ Manual измеряет сопротивление клеточного монослоя с помощью низкого переменного тока, избегая поляризации электродов и предотвращая повреждение клеток. По мере роста клеток и образования плотных соединений сопротивление увеличивается, что позволяет исследователям отслеживать плотность клеточных слоев и функцию барьера с течением времени. Значения TEER рассчитываются путем умножения измеренного сопротивления на площадь поверхности мембраны (Ω·cm²), что позволяет проводить стандартизированное сравнение результатов экспериментов.

Совместимость и интеграция с системой

• Совместим с электродами STX4, STX HTS, EndOhm и устаревшими электродами (может потребоваться адаптер)
• Поддерживает ручные рабочие процессы TEER и дополняет автоматизированные системы, такие как EVOM™ Auto
• Легко интегрируется в существующие лабораторные рабочие процессы посредством экспорта данных через USB

Какой электрод EVOM™ подходит именно для вашего применения?

EVOM™ Manual можно использовать с различными электродами. Три наиболее распространенных варианта включают STX4, STX HTS и камеры Endohm. Используйте эту сравнительную таблицу, чтобы выбрать наиболее подходящий электрод для вашего применения.

EVOM™ Manual контролирует здоровье клеток

Система EVOM компании WPI популярна в исследовательском сообществе и обычно используется для оценки здоровья клеток млекопитающих путем измерения трансэпителиального/трансэндотелиального электрического сопротивления (TEER или TER) клеточных слоев. 

EVOM™ Manual работает по тому же принципу, что и более ранние модели EVOM (EVOMX, EVOM, EVOM2 и EVOM3). Он обладает расширенными возможностями для более удобного проведения экспериментов. Благодаря новому сенсорному дисплею теперь можно сохранять данные в виде файлов Microsoft® Excel на флэш-накопителе USB. Просто извлеките флэш-накопитель со всеми записанными данными из EVOM™ Manual и подключите его к компьютеру, чтобы получить доступ к данным и построить график. Также теперь есть возможность использовать Windows-приложение.

TEER: Трансцеллюлярный и парацеллюлярный пути прохождения ионов или электрического тока

Ионы и электрический ток могут транспортироваться через клетки (трансцеллюлярно) и через пространство между соседними клетками (парацеллюлярно), как показано на рисунке ниже. 

Основной принцип работы EVOM™ Manual TEER Measurement

Электрическое сопротивление (т.е. TEER) клеточного слоя - это обратное представление электрической проводимости через клеточный слой. Высокое значение TEER клеточного слоя свидетельствует об интактном клеточном монослое и предполагает низкую или ограниченную проницаемость ионов и молекул (т.е. низкую проводимость). Аналогично, снижение значения TEER свидетельствует о нарушении барьерной функции и указывает на повышенную проницаемость. Для исследования проницаемости тканей необходим сливающийся клеточный слой, и измерение TEER обычно используется для подтверждения образования сливающегося монослоя. 

Первоначально, через 24 часа после засева клеток в трансвелл, значения TEER обычно низкие, поскольку ток легко проходит между клетками. Со временем клетки размножаются и начинают заполнять промежутки. Наконец, образуется сливающийся клеточный монослой. В этот момент проницаемая мембрана полностью покрыта клетками и не позволяет легко проходить электрическому току. Это приводит к высокому значению TEER.

Измерение TEER для негерметичных и герметичных типов клеток

Значения TEER в монослоях сливающихся клеток могут варьироваться в зависимости от типа клеток. Монослои некоторых типов клеток (например, клеток типа А), которые обычно показывают низкие значения TEER, обычно имеют относительно герметичные узкие соединения. Монослои других типов клеток (например, клеток типа В) показывают высокие значения TEER, и эти типы клеток, как известно, имеют плотные узкие соединения. Известно, что ионы и молекулы легче проходят через неплотные клеточные слои по сравнению с плотными клеточными слоями. Наличие большего количества трансцеллюлярных ионных каналов на клетках может облегчить прохождение ионов или электрического тока по трансцеллюлярному пути, что может дополнительно снизить значения TEER.

Тип клеток А позволяет большему количеству тока и ионов проходить между клетками и дает низкое значение TEER. Монослои клеток типа В с их более плотными соединениями покажут более высокое значение TEER. Хотя оба монослоя являются конфлюентными, значения сопротивления TEER могут заметно отличаться в зависимости от природы самих клеток. 

Почему стоит выбрать систему EVOM компании WPI?

Компания WPI была пионером во внедрении упрощенной методики измерения TEER с помощью EVOM, и на сегодняшний день система EVOM компании WPI остается самым популярным устройством для измерения значений TEER в трансвеллах. EVOM™ Manual — это новейшая версия эпителиальных вольтметров, обладающая рядом усовершенствованных функций. EVOM™ Manual имеет интерфейс с сенсорным экраном, что делает его простым в использовании. Измерение TEER с помощью EVOM — это неинвазивный метод мониторинга здоровья клеток.

Для количественного анализа образцов с более высокой точностью и простым хранением данных рассмотрите EVOM™ Manual. Неинвазивный метод определения EVOM позволяет использовать тот же образец для других экспериментальных анализов.

Технические характеристики эпителиального измерителя вольт/Ом (TEER) EVOM3

Частота отбора образцов тканей: 12,5 Гц

Усреднение образцов: 20 образцов в секунду

Диапазоны сопротивления:

• от 0 до 10 000 Ом
• от 0 до 50 000 Ом
• от 0 до 100 000 Ом +5%

Автоматический режим: 1 до 100,000 Ом автоматический ток 2 мкА, 4 мкА, 10 мкА

Разрешение сопротивления: 0,1 Ом (менее 200 Ом); 1 Ом (более 200 Ом)

Точность сопротивления: +/-1 Ом (менее 1000 Ом), +/-0,1% (более 1000 Ом)

Диапазон напряжения: +/- 200 мВ

Разрешение по напряжению: 0,001 В, 0,1 мВ

Точность напряжения: ± 0,1 мВ

Уровни тока:

• 2 мкА (шкала 100 кОм);
• 4 мкА (шкала 50 кОм);
• 10 мкА (шкала 10 кОм);
• Автоматический режим от 1 до 100 000 Ом, автоматический ток 2 мкА, 4 мкА, 10 мкА.

Скорость обновления дисплея: 0,5 секунды

Аккумулятор: 3,7 В литий-ионный 2500 мАч

Время зарядки: 5,5 часов (выключеное питание); 8 часов (время работы)

Ток заряда: 200 мА

Питание: 5 В постоянного тока, ~250 мА

Сертификация CE

Возможность обновления прошивки*: да

*Примечание: Для обновления прошивки необходим кабель USB-Mini-B (WPI #803026), а также программное обеспечение загрузчика ПК и образ прошивки.

Компоненты системы

Что входит в комплект EVOM3:

EVOM™ Ручной эпителиальный вольт-омметр 1

300749 : USB-накопитель 32 ГБ (Используется для хранения данных. Также содержит программу Python 3.8 для непрерывного цифрового мониторинга целевой вставки). 1

503535 : USB-кабель 1

99673 : Калибровочный набор, тестовый резистор 1000 Ом 1

803025 : Сетевой шнур A/C и зарядное устройство 1

13142 : Ножной переключатель 1

ПРИМЕЧАНИЕ: Адаптер 99672 для ручного электрода EVOM2 к EVOM продается отдельно. STX2, STX3 и все STX100 требуют использования этого адаптера с EVOM3 или EVOM Manual.

Опционные электроды для EVOM™ Manual

Электроды для измерения эпителиального TEER

EVM-EL-03-03-01: Электрод STX4 EVOM™ со съемными лезвиями для измерения TEER в вставках 6,5 мм

EVM-EL-03-03-05: Электрод STX HTS EVOM™ для ручного EVOM, используется с 96-луночным планшетом Corning HTS

EVM-EL-03-03-02: Электрод STX HTS EVOM™ для ручного EVOM, используется с 96-луночным планшетом Millipore Multiscreen HTS

EVM-EL-03-03-03: Электрод STX HTS EVOM™ для ручного EVOM, используется с системой вставок Corning Biocoat/Falcon HTS Multi на 24 лунки

EVM-EL-03-03-04: Электрод STX HTS EVOM™ для ручного EVOM, используется с системой вставок Corning Costar HTS Multi на 24 лунки

Камеры ENDOHM для измерения эндотелия/эпителия

EVM-EL-03-01-01: Электрод ENDOHM-6 EVOM™ для TEER в вставке 6,5 мм / культуральной чашке (24 лунки на планшете)

EVM-EL-03-01-02: Электрод ENDOHM-12 EVOM™ для TEER в вставке 12 мм / культуральной чашке (12 лунок на планшете)

EVM-EL-03-01-03: Электрод ENDOHM-24 EVOM™ для TEER в вставке 24 мм / культуральной чашке (6 лунок на планшете)

Применение эпителиального измерителя вольт/Ом (TEER) EVOM3

• измерение эпителиальных или эндотелиальных тканей для определения конфлюентности, TEER и разности потенциалов;
• исследования проницаемости, проводимости и лекарственных препаратов;
• непрерывный цифровой мониторинг целевой мембраны;
• общие исследования;
• транспорт через гематоэнцефалический барьер;
• исследования эпителиальной ткани легких;
• исследования тканей кишечника;
• исследования кожи.

EVOM3 TEER: основные области применения

Вот три области применения, где обычно используется измерение TEER. При измерении функции клеточного барьера повышение значений TEER обычно коррелирует с повышением барьерной функции. Аналогично, повышение значения TEER до максимального уровня может указывать на то, что клеточный слой достиг конфлюэнции. Клеточная цитотоксичность может быть оценена путем измерения TEER. Высокие значения TEER указывают на более здоровый клеточный слой. По мере отмирания клеток в клеточном слое могут образовываться пустоты, и значение TEER может снижаться.

TEER EVOM3: новые области применения

Система EVOM компании WPI широко использовалась для изучения здоровья и функционирования тканей in vitro в двухмерном (2-D) или трехмерном формате. В последние годы для высокопроизводительного скрининга лекарств и изучения заболеваний все большее внимание уделяется созданию трехмерных тканей in vitro, которые напоминают ткани in vivo и демонстрируют соответствующие функциональные свойства. Измерение TEER используется как один из методов оценки и сравнения того, насколько близко ткани in vitro могут последовательно имитировать ткани in vivo. EVOM3 может использоваться в трехмерных моделях in vitro, таких как барьер кровь-мозг (BBB), инфекция вируса Линга, а также ткани кишечника, почек и печени.