Применение хемилюминесценции 

Хемилюминесценция — это нерадиоактивная химическая реакция, которая производит белый свет. В хемилюминесцентном вестерн-блоттинге хемилюминесценция возникает, когда хемилюминесцентный субстрат, прикрепленный к антителу, связанному с вашим целевым белком, подвергается ферментной реакции. Хемилюминесценция более чувствительна, чем колориметрическое определение белка, поскольку антитело нацелено конкретно на ваш белок, а фермент усиливает световой сигнал. Методы, обычно используемые для получения хемилюминесценции, включают ECL, где HRP (пероксидаза редьки) окисляет люминол, или CDP-Star®, где 1,2-диоксетановое соединение дефосфорилируется щелочной фосфатазой. Для визуализации полученных полос можно использовать рентгеновские пленки, что может занять много времени и быть дорогостоящим, или охлаждаемые системы на основе CCD-камер для получения цифровых изображений. Поскольку хемилюминесцентные молекулы производят так много фотонов света, при использовании правильных типов технологий захвата изображений можно использовать хемилюминесценцию для обнаружения белков, которые экспрессируются на низком уровне. Поскольку хемилюминесцентный свет генерируется изнутри, ваш образец белка не повреждается, и вы можете использовать его повторно.

Хемилюминесцентный вестерн-блоттинг

Хемилюминесцентный вестерн-блоттинг — лучшая методика, если вам необходимо высокочувствительное определение одного белка. Использование специализированной хемилюминесцентной CCD-системы, такой как GeneGnome XRQ для визуализации хемилюминесцентных вестерн-блотов, дает более широкий динамический диапазон, чем пленка, позволяя безопасно и точно обнаруживать и анализировать пикограммовые и даже фемтограммовые уровни белка.

С помощью мощного программного обеспечения GeneSys системы Syngene GeneGnome XRQ вы просто выбираете используемый хемилюминесцентный субстрат, система автоматически захватывает один или серию изображений, гарантируя, что вы без усилий получите идеально экспонированное изображение без использования пленки.

Если вы ищете систему, которая позволяет получать изображения хемилюминесцентных и флуоресцентных вестерн-блотов, системы Syngene G:BOX Chemi или G:BOX mini — идеальный выбор.

Хемилюминесцентный вестерн-блот

Первичное антитело (1°) связывается с целевым белком на мембране. Затем мембрана инкубируется с хемилюминесцентным субстратом, например, HRP. Происходит ферментативная реакция с выделением света, который регистрируется CCD-камерой.